Ташаккур ба шумо барои боздид аз Nature.com.Шумо версияи браузерро бо дастгирии маҳдуди CSS истифода мебаред.Барои таҷрибаи беҳтарин, мо тавсия медиҳем, ки шумо браузери навшударо истифода баред (ё Ҳолати мутобиқатро дар Internet Explorer хомӯш кунед).Илова бар ин, барои таъмини дастгирии доимӣ, мо сайтро бе услубҳо ва JavaScript нишон медиҳем.
Якбора карусели се слайдро намоиш медиҳад.Тугмаҳои Пешина ва Ояндаро истифода баред, то дар як вақт дар се слайд гузаред ё тугмаҳои слайдерро дар охир истифода баред, то дар як вақт аз се слайд гузаред.
Спектрометри ултра-паймон (54 × 58 × 8,5 мм) ва диафрагмааш васеъ (1 × 7 мм) нӯҳ ранга таҳия карда шуд, ки аз рӯи массиви даҳ оинаи дихронӣ «ба ду тақсим» карда шудааст, ки барои тасвири фаврии спектралӣ истифода мешуд.Ҷараёни рӯшноии афтанда бо қисмати салиб аз андозаи диафрагма хурдтар ба рахи доимии паҳнои 20 нм ва нӯҳ флюси ранга бо дарозии мавҷҳои марказии 530, 550, 570, 590, 610, 630, 650, 670 ва 690 нм тақсим мешавад.Тасвирҳои нӯҳ ҷараёнҳои ранга дар як вақт тавассути сенсори тасвир ба таври муассир чен карда мешаванд.Баръакси массивҳои оинаи муқаррарии дихроикӣ, массиви оинаи дихроикии таҳияшуда конфигуратсияи беназири ду порча дорад, ки на танҳо шумораи рангҳоро, ки дар як вақт чен кардан мумкин аст, зиёд мекунад, балки инчунин ҳалли тасвирро барои ҳар як ҷараёни ранг беҳтар мекунад.Спектрометри нӯҳ рангаи таҳияшуда барои электрофорези чоркапиллярӣ истифода мешавад.Таҳлили ҳамзамон миқдории ҳашт ранг, ки ҳамзамон дар ҳар як капилляр бо истифода аз флуорессенси нӯҳ рангаи лазерӣ муҳоҷират мекунанд.Азбаски спектрометри нӯҳ ранга на танҳо ултра хурд ва арзон аст, балки дорои ҷараёни баланди рӯшноӣ ва ҳалли кофии спектр барои аксари барномаҳои тасвирии спектрӣ мебошад, он метавонад дар соҳаҳои гуногун васеъ истифода шавад.
Тасвири гиперспектралӣ ва бисёрспектралӣ як ҷузъи муҳими астрономия2, зеҳни фосилавӣ барои мушоҳидаи Замин3,4, назорати сифати ғизо ва об5,6, ҳифзи санъат ва археология7, криминалистика8, ҷарроҳӣ9, таҳлили биотиббӣ ва ташхис10,11 ва ғ. ,12,13.Усулҳои ченкунии спектри нуре, ки аз ҳар як нуқтаи партоб дар майдони назар ҷудо мешаванд, ба (1) сканеркунии нуқта (“ҷорӯб”)14,15, (2) сканеркунии хатӣ (“паникул”)16,17,18 тақсим мешаванд. , (3) дарозии мавҷҳоро скан мекунад19,20,21 ва (4) тасвирҳо22,23,24,25.Дар сурати ҳамаи ин усулҳо, ҳалли фазоӣ, ҳалли спектралӣ ва ҳалли муваққатӣ робитаи мутақобила доранд9,10,12,26.Илова бар ин, баромади рӯшноӣ ба ҳассосият, яъне таносуби сигнал ба садо дар тасвири спектралӣ таъсири назаррас дорад26.Ҷараёни рӯшноӣ, яъне самаранокии истифодаи рӯшноӣ ба таносуби миқдори воқеии ченшудаи рӯшноии ҳар як нуқтаи рӯшноӣ дар як воҳиди вақт ба миқдори умумии нури диапазони ченшудаи дарозии мавҷ мустақиман мутаносиб аст.Категорияи (4) усули мувофиқ аст, вақте ки шиддат ё спектри нури аз ҷониби ҳар як нуқтаи паҳнкунанда бо мурури замон тағир меёбад ё мавқеи ҳар як нуқтаи партов бо мурури замон тағир меёбад, зеро спектри нури аз ҷониби ҳамаи нуқтаҳои паҳнкунанда ҳамзамон чен карда мешавад.24.
Аксари усулҳои дар боло зикршуда бо спектрометрҳои калон, мураккаб ва/ё гаронбаҳо бо истифода аз 18 тор ё 14, 16, 22, 23 призма барои синфҳои (1), (2) ва (4) ё 20, 21 дискҳои филтр, филтрҳои моеъ якҷоя карда мешаванд. .Филтрҳои танзимшавандаи кристаллӣ (LCTF)25 ё филтрҳои танзимшавандаи акусто-оптикӣ (AOTF)19 аз категорияи (3).Баръакси ин, категорияи (4) спектрометрҳои сершумори оина аз сабаби конфигуратсияи оддии худ хурд ва арзон мебошанд27,28,29,30.Илова бар ин, онҳо дорои ҷараёни баланди рӯшноӣ мебошанд, зеро нуре, ки ҳар як оинаи дихроӣ тақсим мекунад (яъне нури интиқолшаванда ва инъикоскунандаи нури афтанда ба ҳар оинаи дихронӣ) пурра ва пайваста истифода мешавад.Аммо, шумораи бандҳои дарозии мавҷ (яъне рангҳо), ки бояд ҳамзамон чен карда шаванд, тақрибан бо чаҳор адад маҳдуд аст.
Тасвирҳои спектралӣ дар асоси муайянкунии флуоресцентҳо одатан барои таҳлили мултиплекс дар ташхис ва ташхиси биотиббӣ истифода мешаванд 10, 13.Ҳангоми мултиплекс, азбаски таҳлилҳои сершумор (масалан, ДНК ё сафедаҳои мушаххас) бо рангҳои гуногуни флюоресцентӣ нишон дода шудаанд, ҳар як таҳлилгари дар ҳар як нуқтаи эмиссия дар майдони назар мавҷудбуда бо истифода аз таҳлили бисёркомпонентӣ миқдори муайян карда мешавад.32 спектри флуорессенси ошкоршударо, ки аз ҳар як нуқтаи эмиссия мебарорад, вайрон мекунад.Дар ин раванд рангҳои гуногун, ки ҳар кадоме флуоресценти гуногун мебароранд, метавонанд колокализатсия шаванд, яъне дар фазо ва вақт якҷоя зиндагӣ кунанд.Дар айни замон шумораи максималии рангҳое, ки тавассути як нури лазерӣ ба ҳаяҷон оварда мешаванд, ҳашт33 аст.Ин маҳдудияти болоӣ на бо қарори спектралӣ (яъне, шумораи рангҳо), балки аз рӯи паҳнои спектри флуоресцентӣ (≥50 нм) ва миқдори тағирёбии ранг Стокс (≤200 нм) дар FRET (бо истифода аз FRET)10 муайян карда мешавад. .Бо вуҷуди ин, шумораи рангҳо бояд аз шумораи рангҳо зиёд ё баробар бошад, то барҳамхӯрии спектрии рангҳои омехтаро бартараф кунад31,32.Аз ин рӯ, зарур аст, ки шумораи рангҳои дар як вақт ченшаванда ба ҳашт ё бештар аз он зиёд карда шавад.
Дар вактхои охир спектрометри ультра компакти гептахрой (бо истифодабарии массиви оинахои гептикрой ва датчики тасвир барои ченкунии чор флюоресценти) сохта шуд.Спектрометр нисбат ба спектрометрҳои муқаррарӣ бо истифода аз панҷараҳо ё призмаҳо аз ду то се дараҷа хурдтар аст34,35.Аммо дар спектрометр зиёда аз 7 оинаи дихроиро љой додан ва дар як ваќт зиёда аз њафт рангро чен кардан душвор аст36,37.Баробари зиёд шудани шумораи оинахои дихрой фарки максималии дарозии роххои оптикии чараёни рушнои дихрой меафзояд ва дар як хамвории сенсорй нишон додани хамаи чараёни рушнои мушкил мегардад.Дарозии дарозтарини роҳи оптикии ҷараёни рӯшноӣ низ зиёд мешавад, бинобар ин паҳнои диафрагмаи спектрометр (яъне паҳнои максималии рӯшноӣ, ки спектрометр таҳлил мекунад) кам мешавад.
Дар посух ба масъалаҳои дар боло зикршуда спектрометри ултра-паймони нуҳ ранга бо массиви оинаи дуқабатаи декахроматии «дихроӣ» ва сенсори тасвир барои тасвири фаврии спектралӣ [категория (4)] таҳия карда шуд.Дар муқоиса бо спектрометрҳои қаблӣ, спектрометри таҳияшуда дар дарозии максималии роҳи оптикӣ ва дарозии максималии оптикӣ камтар фарқият дорад.Он ба электрофорези чоркапиллярӣ барои муайян кардани флуорессенсияи нӯҳ ранга, ки бо лазер ба вуҷуд омадаанд ва барои муайян кардани мигратсияи ҳамзамон ҳашт ранг дар ҳар як капилляр истифода шудааст.Азбаски спектрометри таҳияшуда на танҳо ултра хурд ва арзон аст, балки инчунин дорои ҷараёни баланди рӯшноӣ ва ҳалли кофии спектр барои аксари барномаҳои тасвирии спектрӣ мебошад, он метавонад дар соҳаҳои гуногун васеъ истифода шавад.
Спектрометри анъанавии нӯҳ ранг дар расм нишон дода шудааст.1а.Тарҳрезии он аз спектрометри ультра хурди қаблии ҳафт ранга 31 иборат аст. Он аз нӯҳ оинаи дихроикӣ, ки ба таври уфуқӣ дар кунҷи 45° ба тарафи рост ҷойгир шудаанд, иборат аст ва сенсори тасвир (S) дар болои нӯҳ оинаи дихронӣ ҷойгир аст.Нуре, ки аз поён ворид мешавад (C0) бо массиви нӯҳ оинаи дихронӣ ба нӯҳ ҷараёни рӯшноӣ, ки боло меравад (C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 ва C9) тақсим мешавад.Ҳама нӯҳ ҷараёнҳои ранг мустақиман ба сенсори тасвир дода мешаванд ва ҳамзамон ошкор карда мешаванд.Дар ин тадқиқот, C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 ва C9 бо тартиби дарозии мавҷ ҷойгиранд ва бо рангҳои гулобӣ, бунафш, кабуд, кабуд, сабз, зард, норанҷӣ, сурх-норанҷӣ ва нишон дода шудаанд. сурх, мутаносибан.Гарчанде ки ин аломатҳои рангҳо дар ин ҳуҷҷат истифода мешаванд, тавре ки дар расми 3 нишон дода шудааст, зеро онҳо аз рангҳои воқеии чашми инсон фарқ мекунанд.
Диаграммахои схематикии спектрометрхои мукаррарй ва нави нух-ранга.(a) Спектрометри анъанавии нӯҳ ранга бо массиви нӯҳ оинаи дихронӣ.(б) Спектрометри нави нӯҳ ранга бо массиви оинаи дуқабатаи дихронӣ.Ҷараёни рӯшноӣ C0 ба нӯҳ флюси нури ранга C1-C9 тақсим карда мешавад ва тавассути сенсори тасвир S муайян карда мешавад.
Спектрометри нави нӯҳ рангаи таҳияшуда дорои панҷараи оинаи дуқабата ва сенсори тасвирӣ мебошад, ки дар расми 1б нишон дода шудааст.Дар қабати поёнӣ, панҷ оинаи дихроикӣ 45° ба рост, ки аз маркази массиви декамерҳо ба тарафи рост рост карда шудаанд.Дар сатҳи боло, панҷ оинаи иловагии дихроикӣ 45° ба чап ва аз марказ ба чап ҷойгир шудаанд.Оинаи дихронии чапи қабати поёнӣ ва оинаи росттарини қабати болоӣ ба ҳам меоянд.Ҷараёни рӯшноии афтанда (C0) аз поён ба чор флюси хроматикии баромадкунанда (C1-C4) бо панҷ оинаи дихроӣ дар тарафи рост ва панҷ флюси хроматикии баромад (C5-C4) бо панҷ оинаи дихроӣ дар тарафи чап C9 тақсим карда мешавад.Мисли спектрометрҳои анъанавии нӯҳ ранг, ҳамаи нӯҳ ҷараёнҳои ранг мустақиман ба сенсори тасвир (S) ворид карда мешаванд ва ҳамзамон муайян карда мешаванд.Ракамхои 1а ва 1б-ро мукоиса намуда, дидан мумкин аст, ки дар сурати спектрометри нави нух-ранга хам фарки максималй ва хам дарозтарин рохи оптикии нух флюсхои ранг ду баробар кам мешавад.
Сохтмони муфассали массиви оинаи дуқабатаи ултра хурди 29 мм (паҳно) × 31 мм (умқ) × 6 мм (баландӣ) дар расми 2 нишон дода шудааст. Массиви оинаи даҳӣ аз панҷ оинаи дихроӣ дар тарафи рост иборат аст. (M1-M5) ва панҷ оинаи дихроикӣ дар тарафи чап (M6-M9 ва M5 дигар), ҳар як оинаи дихроикӣ дар кронштейн алюминийи боло ҷойгир карда шудааст.Ҳама оинаҳои дихроикӣ барои ҷуброни ҷойивазкунии параллелӣ аз сабаби рефраксияи ҷараён тавассути оинаҳо ҷуброн карда мешаванд.Дар зер M1 филтри гузариш (BP) муқаррар карда шудааст.Андозаҳои M1 ва BP 10 мм (тарафи дароз) x 1,9 мм (тарафи кӯтоҳ) x 0,5 мм (ғафсӣ) мебошанд.Андозаҳои оинаҳои боқимонда 15 мм × 1,9 мм × 0,5 мм мебошанд.Сатҳи матритсаи байни M1 ва M2 1,7 мм аст, дар ҳоле ки қабати матритсаи дигар оинаҳои дихронӣ 1,6 мм аст.Дар расм.2c ҷараёни рӯшноии рӯшноӣ C0 ва нӯҳ ҷараёнҳои нури рангаи C1-C9-ро, ки бо матритсаи де-камераи оинаҳо ҷудо шудаанд, муттаҳид мекунад.
Сохтмони матритсаи оинаи дуқабатаи дихронӣ.(а) Намоиши перспективӣ ва (б) намуди буришҳои массиви оинаи дуқабата (андозааш 29 мм x 31 мм x 6 мм).Он аз панҷ оинаи дихроикӣ (M1-M5), ки дар қабати поёнӣ ҷойгир аст, панҷ оинаи дихронӣ (M6-M9 ва дигар M5), ки дар қабати боло ҷойгиранд ва филтри гузариш (BP) дар зери M1 ҷойгир аст.(в) Намоиши буриш дар самти амудӣ, бо ҳамгирифтаи C0 ва C1-C9.
Паҳнои диафрагма дар самти уфуқӣ, ки бо паҳнии С0 дар расми 2, в нишон дода шудааст, 1 мм ва дар самти перпендикуляр ба ҳамвории расми 2, в, ки бо тарҳи кронштейн алюминий дода шудааст, – 7 мм.Яъне, спектрометри нави нӯҳ ранга дорои андозаи калони диафрагма ба 1 мм × 7 мм мебошад.Роҳи оптикии C4 дарозтарин дар байни C1-C9 аст ва роҳи оптикии C4 дар дохили массиви оинаи дихроикӣ аз сабаби андозаи ултра-хурд дар боло (29 мм × 31 мм × 6 мм) 12 мм аст.Дар айни замон, дарозии роҳи оптикии C5 дар байни C1-C9 кӯтоҳтарин аст ва дарозии роҳи оптикии C5 5,7 мм аст.Аз ин рӯ, фарқияти максималии дарозии роҳи оптикӣ 6,3 мм аст.Дарозии роҳи оптикии боло барои дарозии роҳи оптикӣ барои интиқоли оптикии M1-M9 ва BP (аз кварц) ислоҳ карда шудааст.
Хусусиятҳои спектралии М1−М9 ва VR тавре ҳисоб карда мешаванд, ки флюсҳои С1, С2, С3, С4, С5, С6, С7, С8 ва С9 дар диапазони дарозии мавҷҳо 520–540, 540–560, 560–580, 580 бошанд. -600, 600-620, 620-640, 640-660, 660-680 ва 680-700 нм.
Сурати матритсаи истеҳсолшудаи оинаҳои декахроматӣ дар расми 3а нишон дода шудааст.M1-M9 ва BP ба нишебии 45-дараҷа ва ҳамвории уфуқии такягоҳи алюминий часпонида шудаанд, дар ҳоле ки M1 ва BP дар қафои расм пинҳон шудаанд.
Истехсоли як катор оинахои деканй ва намоиши он.(а) Маҷмӯи оинаҳои сохташудаи декахроматӣ.(б) Тасвири нӯҳ рангаи 1 мм × 7 мм, ки дар як варақи коғаз дар назди як қатор оинаҳои декахроматӣ ҷойгир карда шудааст ва бо нури сафед равшан карда шудааст.$C) Маҷмӯи оинаҳои декохроматӣ, ки аз қафо бо нури сафед равшан карда шудаанд.(г) Ҷараёни нӯҳ рангаи тақсимшавӣ аз массиви оинаи декан, ки тавассути гузоштани канистри акрилии пур аз дуд дар назди массиви оинаи декан дар c ва тира кардани ҳуҷра мушоҳида мешавад.
Спектрҳои ченшудаи интиқоли M1-M9 C0 дар кунҷи фарорасии 45 ° ва спектри ченшудаи интиқоли BP C0 дар кунҷи фарорасии 0 ° дар расми.4а.Спектрҳои интиқоли C1-C9 нисбат ба C0 дар расм нишон дода шудаанд.4б.Ин спектрҳо аз рӯи спектрҳо дар расм ҳисоб карда шуданд.4а мувофиқи роҳи оптикии C1-C9 дар расми 4а.1б ва 2в.Масалан, TS(C4) = TS (BP) × [1 − TS (M1)] × TS (M2) × TS (M3) × TS (M4) × [1 − TS (M5)], TS(C9 ) = TS (BP) × TS (M1) × [1 - TS (M6)] × TS (M7) × TS (M8) × TS (M9) × [1 - TS (M5)], ки дар он TS(X) ва [ 1 − TS(X)] мутаносибан спектрҳои интиқол ва инъикоси X мебошанд.Тавре ки дар расми 4b нишон дода шудааст, фарохмаҷрои (барои маҷрои ≥50%) C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 ва C9 521-540, 541-562, 563-580, 581-602, 603 мебошанд. -623, 624-641, 642-657, 659-680 ва 682-699 нм.Ин натиҷаҳо ба диапазонҳои таҳияшуда мувофиқанд.Илова бар ин, самаранокии истифодаи нури C0 баланд аст, яъне ҳадди миёнаи интиқоли нури C1-C9 92% аст.
Спектрҳои интиқоли оинаи дихронӣ ва флюси нӯҳ ранга.(а) Спектрҳои ченшудаи интиқоли M1-M9 дар сатҳи 45 ° ва BP дар сатҳи 0 °.(б) Спектрҳои интиқоли C1–C9 нисбат ба C0, ки аз (a) ҳисоб карда шудаанд.
Дар расм.Дар расми 3в, массиви оинаҳои дихроикӣ амудӣ ҷойгир шудааст, ки тарафи рости он дар расми 3а тарафи боло ва чӯби сафеди LED-и коллиматсияшуда (C0) ақиб равшан аст.Маҷмӯи оинаҳои декахроматӣ, ки дар расми 3а нишон дода шудаанд, дар адаптери 54 мм (баландӣ) × 58 мм (умқ) × 8,5 мм (ғафсӣ) насб карда шудаанд.Дар расм.3d, илова ба ҳолати дар расм нишон дода шудааст.3c, зарфи акрилии пур аз дуд дар назди як қатор оинаҳои декохроматӣ бо чароғҳои ҳуҷра хомӯш карда шуд.Дар натиҷа, дар зарф нӯҳ ҷараёнҳои дихроӣ намоёнанд, ки аз як қатор оинаҳои декатроикӣ мебароянд.Ҳар як ҷараёни тақсимшуда дорои як буриши росткунҷаест, ки андозааш 1 × 7 мм аст, ки ба андозаи диафрагмаҳои спектрометри нави нӯҳ ранг мувофиқ аст.Дар расми 3б варақи коғаз дар назди массиви оинаҳои дихроӣ дар расми 3в гузошта шуда, аз самти ҳаракати коғаз тасвири 1х7 мм нӯҳ ҷараёни дихроӣ ба рӯи коғаз проексия карда мешавад.ҷараёнҳо.Нӯҳ ҷараёнҳои ҷудокунии ранг дар расм.3b ва d аз боло ба поён C4, C3, C2, C1, C5, C6, C7, C8 ва C9 мебошанд, ки онро дар расмҳои 1 ва 2 низ дидан мумкин аст. 1b ва 2c.Онҳо дар рангҳои мувофиқ ба дарозии мавҷҳои онҳо мушоҳида мешаванд.Аз сабаби шиддатнокии пасти нури сафеди LED (ниг. Ба расми S3) ва ҳассосияти камераи ранга, ки барои гирифтани C9 (682–699 нм) дар расм истифода мешавад. Ҷараёни дигари тақсимкунӣ заиф мебошанд.Ба ин монанд, C9 ба чашми бараҳна суст намоён буд.Дар ҳамин ҳол, C2 (ҷараёни дуюм аз боло) дар расми 3 сабз ба назар мерасад, аммо ба чашми бараҳна зардтар менамояд.
Гузариш аз расми 3c ба d дар Видеои иловагии 1 нишон дода шудааст. Дарҳол пас аз он ки нури сафед аз LED аз массиви оинаи декахроматӣ мегузарад, он ҳамзамон ба нӯҳ ҷараёни ранг тақсим мешавад.Нихоят дуди зарф аз боло ба поён охиста-охиста паро-канда шуд, ки нух хокаи ранга низ аз боло то поён нест шуд.Баръакси ин, дар Видеои иловагии 2, вақте ки дарозии мавҷи ҷараёни рӯшноӣ дар массиви оинаҳои декахроматӣ аз дароз ба кӯтоҳ бо тартиби 690, 671, 650, 632, 610, 589, 568, 550 ва 532 нм иваз карда шуд ., Танҳо ҷараёнҳои мувофиқи тақсимоти нӯҳ ҷараёнҳои тақсимшуда бо тартиби C9, C8, C7, C6, C5, C4, C3, C2 ва C1 намоиш дода мешаванд.Обанбори акрилӣ бо ҳавзи кварц иваз карда мешавад ва пораҳои ҳар як ҷараёни шунтшударо аз самти нишеб ба боло равшан мушоҳида кардан мумкин аст.Илова бар ин, зер-видео 3 тавре таҳрир карда мешавад, ки қисми тағирёбии дарозии мавҷи зер-видео 2 такрор карда шавад.Ин ифодаи равшантарини хусусиятхои массиви декохроматии оинахо мебошад.
Натиҷаҳои дар боло овардашуда нишон медиҳанд, ки массиви оинаи декахроматии истеҳсолшуда ё спектрометри нави нӯҳ ранг мувофиқи таъиншуда кор мекунад.Спектрометри нави нӯҳ ранга тавассути насб кардани як қатор оинаҳои декахроматӣ бо адаптерҳо мустақиман ба тахтаи сенсори тасвир сохта шудааст.
Ҷараёни рӯшноӣ бо дарозии мавҷ аз 400 то 750 нм, ки аз чаҳор нуқтаи радиатсионӣ φ50 мкм, дар фосилаи 1 мм дар самти перпендикуляр ба ҳамвории расми 2в ҷойгир шудааст, мутаносибан Тадқиқотҳои 31, 34. Массиви чор линза иборат аст аз чор линзаи φ1 мм бо дарозии фокуси 1,4 мм ва қадри 1 мм.Чор ҷараёнҳои коллиматсияшуда (чор C0) дар DP-и спектрометри нави нӯҳ ранга, ки дар фосилаи 1 мм ҷойгиранд, меоянд.Маҷмӯи оинаҳои дихронӣ ҳар як ҷараёнро (C0) ба нӯҳ ҷараёнҳои ранга (C1-C9) тақсим мекунад.Дар натиҷа 36 ҷараён (чор маҷмӯи C1-C9) баъдан мустақиман ба сенсори тасвири CMOS (S) ворид карда мешаванд, ки мустақиман ба як қатор оинаҳои дихронӣ пайваст карда шудаанд.Дар натича, чунон ки дар расми 5а нишон дода шудааст, аз сабаби хурди фарки рохи оптикии максимум ва рохи кутохи оптикии максимум тасвирхои хамаи 36 чараён дар як вакт ва равшан бо андозаи якхела ошкор карда шуданд.Мувофиқи спектрҳои поёноб (ниг. ба расми S4), шиддатнокии тасвири чор гурӯҳи C1, C2 ва C3 нисбатан паст аст.36 тасвири андозаи 0,57 ± 0,05 мм (ба ҳисоби миёна ± SD) буд.Ҳамин тариқ, афзоиши тасвир ба ҳисоби миёна 11,4 буд.Фосилаи амудии байни тасвирҳо ба ҳисоби миёна 1 мм (ҳамон фосила бо массиви линзаҳо) ва фосилаи уфуқӣ ба ҳисоби миёна 1,6 мм (ҳамон фосила бо массиви оинаи дихроикӣ) аст.Азбаски андозаи тасвир аз масофаи байни тасвирҳо хеле хурдтар аст, ҳар як тасвирро мустақилона чен кардан мумкин аст (бо пахши паст).Дар ҳамин ҳол, тасвирҳои бисту ҳашт ҷараёне, ки аз ҷониби спектрометри муқаррарии ҳафт ранга, ки дар таҳқиқоти қаблии мо истифода шудааст, дар расми 5 B нишон дода шудаанд. Массиви ҳафт оинаи дихроӣ тавассути хориҷ кардани ду оинаи росттарин аз массиви нӯҳ дихроӣ сохта шудааст. оинаҳо дар расми 1а.На ҳама тасвирҳо равшананд, андозаи тасвир аз C1 то C7 меафзояд.Бисту ҳашт тасвири андозаи 0,70 ± 0,19 мм мебошанд.Аз ин рӯ, нигоҳ доштани ҳалли баланди тасвир дар ҳама тасвирҳо душвор аст.Коэффисиенти тағирёбӣ (CV) барои андозаи 28 дар расми 5b 28% буд, дар ҳоле ки CV барои андозаи 36 дар расми 5а то 9% коҳиш ёфт.Натиҷаҳои боло нишон медиҳанд, ки спектрометри нави нӯҳ ранг на танҳо шумораи рангҳои ҳамзамон ченшавандаро аз ҳафт то нӯҳ зиёд мекунад, балки барои ҳар як ранг дорои қобилияти баланди тасвир мебошад.
Муқоисаи сифати тасвири тақсимшуда, ки аз ҷониби спектрометрҳои муқаррарӣ ва нав ташкил карда шудааст.(a) Чаҳор гурӯҳи тасвирҳои ҷудошудаи нӯҳ ранг (C1-C9), ки аз ҷониби спектрометри нави нӯҳ ранг тавлид шудаанд.(б) Чаҳор маҷмӯи тасвирҳои аз ҳафт ранг ҷудошуда (C1-C7), ки бо спектрометри муқаррарии ҳафт ранг ташкил карда шудаанд.Флюсҳо (C0) бо дарозии мавҷҳо аз 400 то 750 нм аз чаҳор нуқтаи эмиссия мутаносибан ба ҳар як спектрометр коллиматсия карда мешаванд.
Характеристикахои спектралии спектрометри нух ранга ба таври тачрибавй бахо дода шуда, натичахои баходихй дар расми 6 нишон дода шудаанд. Дар хотир доред, ки дар расми 6а натичахои якхелаи расми 5а нишон дода шудааст, яъне дар дарозии мавчхои 4 С0 400—750 нм хамаи 36 тасвир муайян карда мешавад. (4 гурӯҳ C1–C9).Баръакс, тавре ки дар расми 6b–j нишон дода шудааст, вақте ки ҳар як C0 дарозии мавҷи мушаххаси 530, 550, 570, 590, 610, 630, 650, 670 ё 690 нм дорад, тақрибан чор тасвири мувофиқ мавҷуд аст (чор тасвир). гурӯҳҳои муайян C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 ё C9).Бо вуҷуди ин, баъзе аз тасвирҳои шафати чаҳор тасвири мувофиқ хеле суст муайян карда мешаванд, зеро спектрҳои интиқоли C1–C9, ки дар расми 4b нишон дода шудаанд, каме ба ҳам мепайвандад ва ҳар як C0 дорои банди 10 нм дар дарозии мавҷи мушаххас, тавре ки дар усул тавсиф шудааст, дорад.Ин натиҷаҳо бо спектрҳои интиқоли C1-C9, ки дар расм нишон дода шудаанд, мувофиқанд.4b ва видеоҳои иловагии 2 ва 3. Ба ибораи дигар, нӯҳ спектрометри ранг дар асоси натиҷаҳое, ки дар расми 1 нишон дода шудааст, кор мекунад.4б.Аз ин рӯ, хулоса бароварда мешавад, ки тақсимоти шиддатнокии тасвир C1-C9 спектри ҳар як С0 мебошад.
Хусусиятҳои спектрии спектрометри нӯҳ ранга.Спектрометри нави нӯҳ ранг чаҳор маҷмӯи тасвирҳои ҷудошудаи нӯҳ рангро (C1-C9) тавлид мекунад, вақте нури афтанда (чор C0) дарозии мавҷи (a) 400-750 нм (тавре ки дар расми 5а нишон дода шудааст), (б) аст. 530 нм.нм, (в) 550 нм, (г) 570 нм, (д) 590 нм, (е) 610 нм, (г) 630 нм, (з) 650 нм, (и) 670 нм, (й) 690 нм, мутаносибан.
Спектрометри нӯҳ рангаи таҳияшуда барои электрофорези чоркапиллярӣ истифода шудааст (барои тафсилот, ба маводҳои иловагӣ нигаред)31,34,35.Матритсаи чоркапиллярӣ аз чор капилляр (диаметри берунӣ 360 мкм ва диаметри дарунӣ 50 мкм) иборат аст, ки дар фосилаи 1 мм дар макони шуои лазер ҷойгиранд.Намунаҳое, ки дорои порчаҳои ДНК бо 8 ранг нишон дода шудаанд, аз ҷумла FL-6C (ранг 1), JOE-6C (ранг 2), dR6G (ранг 3), TMR-6C (ранг 4), CXR-6C (ранг 5), TOM- 6C (ранг 6), LIZ (ранг 7) ва WEN (ранг 8) бо тартиби болоравии дарозии мавҷҳои флуоресцентӣ, ки дар ҳар як аз чаҳор капиллярҳо ҷудо шудаанд (минбаъд Cap1, Cap2, Cap3 ва Cap4).Флуорессенсияи лазерӣ аз Cap1-Cap4 бо массиви чаҳор линза ҳамоҳанг карда шуд ва ҳамзамон бо спектрометри нӯҳ ранг сабт карда шуд.Динамикаи интенсивии флуоресценти нух ранга (С1-С9) хангоми электрофорез, яъне электрофореграммаи нухрангаи хар як капилляр дар расми 7а нишон дода шудааст.Дар Cap1-Cap4 электрофореграммаи нӯҳ ранга ба даст оварда мешавад.Тавре ки аз тирҳои Cap1 дар расми 7а нишон дода шудааст, ҳашт қуллаи ҳар як электрофореграммаи нӯҳ ранг мутаносибан як партови флуоресцентиро аз Dye1-Dye8 нишон медиҳад.
Миқдори ҳамзамон ҳашт ранг бо истифода аз спектрометри электрофорези нӯҳ рангаи чоркапиллярӣ.$А) Электрофореграммаи нӯҳ ранга (C1-C9) ҳар як капилляр.Ҳашт қуллаи бо тирчаҳои Cap1 нишондодашуда партовҳои флуорессенси инфиродии ҳашт рангро нишон медиҳанд (Dye1-Dye8).Рангҳои тирҳо ба рангҳои (б) ва (в) мувофиқат мекунанд.(б) Спектрҳои флуоресцентии ҳашт ранг (Dye1-Dye8) дар як капилляр.в Электроферограммаҳои ҳашт ранг (Dye1-Dye8) дар як капилляр.Қуллаҳои пораҳои ДНК-и Dye7 бо тирчаҳо нишон дода шудаанд ва дарозии пойгоҳи Cap4 нишон дода шудаанд.
Тақсимоти шиддатнокии C1–C9 дар ҳашт қулла дар расм нишон дода шудааст.7б, мутаносибан.Азбаски ҳарду C1-C9 ва Dye1-Dye8 бо тартиби дарозии мавҷ ҳастанд, ҳашт тақсимот дар расми 7b спектрҳои флуорессенси Dye1-Dye8-ро пайдарпай аз чап ба рост нишон медиҳанд.Дар ин тадқиқот, Ранг1, Ранг2, Ранг3, Ранг4, Ранг5, Ранг6, Ранг7 ва Ранг8 мутаносибан дар рангҳои гулобӣ, бунафш, кабуд, кабуд, сабз, зард, норанҷӣ ва сурх пайдо мешаванд.Дар хотир доред, ки рангҳои тирчаҳои дар расми 7а ба рангҳои ранг дар расми 7б мувофиқат мекунанд.Шиддати флуорессенсияи C1-C9 барои ҳар як спектр дар расми 7б ба эътидол оварда шудааст, то маблағи онҳо ба як баробар бошад.Аз Cap1-Cap4 ҳашт спектри эквиваленти флуоресцентӣ гирифта шуд.Бархӯрди спектрии флуоресцентро байни рангҳои 1-ранги 8 ба таври возеҳ мушоҳида кардан мумкин аст.
Тавре ки дар расми 7c нишон дода шудааст, барои ҳар як капилляр, электрофореграммаи нӯҳ ранг дар расми 7а тавассути таҳлили бисёркомпонентӣ дар асоси ҳашт спектри флуоресцентӣ дар расми 7b ба электроферограммаи ҳаштранг табдил дода шуд (барои тафсилот ба Маводҳои иловагӣ нигаред).Азбаски такрори спектрии флуоресцент дар расми 7а дар расми 7c нишон дода нашудааст, Ранг1-Ранги 8-ро дар ҳар як вақт алоҳида муайян кардан ва миқдор кардан мумкин аст, ҳатто агар миқдори гуногуни Ранг1-Ранги8 дар як вақт флуорессия.Инро бо муайянкунии анъанавии ҳафт ранг анҷом додан мумкин нест31, аммо метавон бо кашфи нӯҳ ранг ба даст овард.Тавре ки аз тирҳои Cap1 дар расми 7c нишон дода шудааст, танҳо синглҳои партобҳои флуоресцентӣ Dye3 (кабуд), Dye8 (сурх), Dye5 (сабз), Dye4 (кабуд), Dye2 (бунафш), Dye1 (magenta) ва Dye6 (зард) ) бо тартиби пешбинишудаи хронологй мушохида карда мешаванд.Барои партовҳои флюоресцентии ранг 7 (норанҷӣ), ба ғайр аз қуллаи ягонае, ки бо тирчаи норанҷӣ нишон дода шудааст, якчанд қуллаҳои дигари ягона мушоҳида карда шуданд.Ин натиҷа аз он иборат аст, ки намунаҳо стандартҳои андоза доранд, Dye7 порчаҳои ДНК-ро бо дарозии пойҳои гуногун нишон додаанд.Тавре ки дар расми 7c нишон дода шудааст, барои Cap4 дарозии пойгоҳҳо 20, 40, 60, 80, 100, 114, 120, 140, 160, 180, 200, 214 ва 220 дарозии пойгоҳ мебошанд.
Хусусиятҳои асосии спектрометри нӯҳ ранга, ки бо истифода аз матритсаи оинаҳои дуқабатаи дихронӣ таҳия шудааст, андозаи хурд ва тарҳи оддӣ мебошанд.Азбаски массиви оинаҳои декахроматӣ дар дохили адаптер дар расм нишон дода шудааст.3c, ки бевосита дар тахтаи сенсори тасвир насб карда шудааст (ниг. Расми S1 ва S2), спектрометри нӯҳ ранга андозаи адаптерро дорад, яъне 54 × 58 × 8,5 мм.(ғафсӣ).Ин андозаи ултра хурд нисбат ба спектрометрҳои анъанавӣ, ки торҳо ё призмаҳоро истифода мебаранд, аз ду то се дараҷа хурдтар аст.Илова бар ин, азбаски спектрометри нӯҳ ранга тавре танзим шудааст, ки нур ба рӯи сенсори тасвир перпендикуляр мезанад, фосиларо барои спектрометри нӯҳ ранг дар системаҳо ба монанди микроскопҳо, ситометрҳои ҷараён ё анализаторҳо ба осонӣ ҷудо кардан мумкин аст.Анализатори электрофорези капиллярӣ барои боз ҳам хурдтар кардани система.Дар айни замон, андозаи даҳ оинаҳои дихронӣ ва филтрҳои гузарандае, ки дар спектрометри нӯҳ ранг истифода мешаванд, танҳо 10 × 1,9 × 0,5 мм ё 15 × 1,9 × 0,5 мм аст.Ҳамин тариқ, зиёда аз 100 чунин оинаҳои хурди дихроикӣ ва филтрҳои гузарандаро мутаносибан аз оинаи дихроикӣ ва филтри диапазони 60 мм2 буридан мумкин аст.Аз ин рӯ, як қатор оинаҳои декахроматиро метавон бо арзиши кам истеҳсол кард.
Хусусияти дигари спектрометри нух-ранга хусусиятхои аълои спектралии он мебошад.Аз чумла, он имкон медихад, ки тасвирхои спектралии аксхои лахзавй, яъне дар як вакт ба даст овардани тасвирхо бо ахбороти спектралй.Барои ҳар як тасвир, спектри муттасил бо диапазони дарозии мавҷ аз 520 то 700 нм ва ҳалли 20 нм гирифта шуд.Ба ибораи дигар, барои ҳар як тасвир нӯҳ шиддатнокии ранги рӯшноӣ муайян карда мешавад, яъне нӯҳ бандҳои 20 нм, ки диапазони дарозии мавҷро аз 520 то 700 нм баробар тақсим мекунанд.Бо иваз кардани характеристикаҳои спектрии оинаи дихроикӣ ва филтри гузариш диапазони дарозии мавҷи нӯҳ банд ва паҳнои ҳар як бандро метавон танзим кард.Муайянкунии нӯҳ рангро на танҳо барои андозагирии флуоресцентӣ бо тасвири спектралӣ (тавре ки дар ин гузориш тавсиф шудааст), балки барои бисёр барномаҳои дигари маъмул бо истифода аз тасвири спектр истифода бурдан мумкин аст.Ҳарчанд тасвири гиперспектрӣ метавонад садҳо рангро муайян кунад, маълум шудааст, ки ҳатто бо коҳиши назарраси шумораи рангҳои ошкоршаванда, объектҳои сершумор дар майдони назарро барои бисёр барномаҳо бо дақиқии кофӣ муайян кардан мумкин аст38,39,40.Азбаски ҳалли фазоӣ, ҳалли спектралӣ ва ҳалли муваққатӣ дар тасвири спектрӣ бархӯрд доранд, кам кардани шумораи рангҳо метавонад ҳалли фазоӣ ва ҳалли муваққатиро беҳтар кунад.Он инчунин метавонад спектрометрҳои оддиеро, ки дар ин таҳқиқот таҳия шудааст, истифода барад ва миқдори ҳисобкуниро минбаъд кам кунад.
Дар ин тадқиқот, ҳашт ранг ҳамзамон бо роҳи ҷудокунии спектрии спектрҳои флуорессенси такрории онҳо дар асоси ошкор кардани нӯҳ ранг миқдори муайян карда шуданд.То нӯҳ рангро дар як вақт муайян кардан мумкин аст, ки дар вақт ва фазо бо ҳам вуҷуд доранд.Бартарии махсуси спектрометри нухранга дар он аст, ки ҷараёни баланди рӯшноӣ ва диафрагмаи калон (1 × 7 мм) мебошад.Массиви оинаи деканӣ интиқоли ҳадди аксар 92% нурро аз диафрагма дар ҳар як нӯҳ диапазони дарозии мавҷ дорад.Самаранокии истифодаи нури афтанда дар доираи дарозии мавҷ аз 520 то 700 нм қариб 100% аст.Дар чунин доираи васеи дарозии мавҷҳо, ягон торчаи дифраксионӣ ин қадар самаранокии баланди истифодаро таъмин карда наметавонад.Ҳатто агар самаранокии дифраксионии панҷараи дифраксионӣ дар дарозии мавҷи муайян аз 90% зиёд бошад ҳам, бо зиёд шудани фарқияти байни ин дарозии мавҷ ва дарозии мавҷ, самаранокии дифраксия дар дарозии мавҷи дигар коҳиш меёбад41.Паҳнои диафрагма перпендикуляр ба самти ҳавопаймо дар расми 2в метавонад аз 7 мм то паҳнои сенсори тасвир, масалан, дар мавриди сенсори тасвирие, ки дар ин таҳқиқот истифода шудааст, бо роҳи каме тағир додани массиви декамер дароз карда шавад.
Спектрометри нух-рангаро на танхо барои электрофорези капиллярй, чунон ки дар ин тадкикот нишон дода шудааст, балки барои дигар максадхо низ истифода бурдан мумкин аст.Масалан, чи тавре ки дар расми зер нишон дода шудааст, ба микроскопи флуоресценти спектрометри нух ранга истифода бурдан мумкин аст.Ҳавои намуна дар сенсори тасвири спектрометри нӯҳ ранг тавассути объекти 10x нишон дода мешавад.Масофаи оптикии байни объектив ва сенсори тасвир 200 мм аст, дар ҳоле ки масофаи оптикии байни сатҳи ҳодисаи спектрометри нуҳ ранга ва сенсори тасвир танҳо 12 мм аст.Аз ин рӯ, тасвир тақрибан ба андозаи диафрагма (1 × 7 мм) дар ҳамвории ҳодиса бурида шуд ва ба нӯҳ тасвири ранга тақсим карда шуд.Яъне, тасвири спектралии тасвири нӯҳ рангаро дар майдони 0,1×0,7 мм дар ҳамвории намуна гирифтан мумкин аст.Гайр аз ин, бо рохи скан кардани намуна нисбат ба объекти дар самти уфуки дар расми 2в тасвири нухрангаи спектралии майдони калонтарро дар хамвории намуна гирифтан мумкин аст.
Қисмҳои массиви оинаи декахроматӣ, аз ҷумла M1-M9 ва BP, аз ҷониби Asahi Spectra Co., Ltd. бо истифода аз усулҳои стандартии боришот сохта шудаанд.Маводҳои диэлектрикии бисёрқабата ба даҳ лавҳаи кварси андозаи 60 × 60 мм ва ғафсии 0,5 мм, ки ба талаботҳои зерин мувофиқанд: M1: IA = 45°, R ≥ 90% дар 520–590 нм, Tave ≥ 90% дар 610–. 610 нм.700 нм, М2: IA = 45°, R ≥ 90% дар 520–530 нм, Таве ≥ 90% дар 550–600 нм, M3: IA = 45°, R ≥ 90% дар 540–550 ≥9, % дар 570–600 нм, M4: IA = 45°, R ≥ 90% дар 560–570 нм, Tave ≥ 90% дар 590–600 нм, M5: IA = 45°, R ≥ 98% дар 58060 нм , R ≥ 98% дар 680–700 нм, M6: IA = 45°, Tave ≥ 90% дар 600–610 нм, R ≥ 90% дар 630–700 нм, M7: IA = 45°, R ≥90 620–630 нм, Тав ≥ 90% дар 650–700 нм, M8: IA = 45°, R ≥ 90% дар 640–650 нм, Taw ≥ 90% дар 670–700 нм, M9: IA = ≥ 90% дар 650-670 нм, Tave ≥ 90% дар 690-700 нм, BP: IA = 0°, T ≤ 0,01% дар 505 нм, Таве ≥ 95% дар 530-690 нм ≥ 0м 95 дар -690 нм ва T ≤ 1% дар 725-750 нм, ки дар он IA, T, Tave ва R кунҷи паҳншавӣ, гузаранда, гузариши миёна ва инъикоси нури поляризатсияшуда мебошанд.
Нури сафед (C0) бо диапазони дарозии мавҷи 400-750 нм, ки аз ҷониби манбаи рӯшноии LED (AS 3000, AS ONE CORPORATION) мебарояд, ба ҳам пайваст ва амудӣ ба DP-и як қатор оинаҳои дихроикӣ меафтад.Спектри нури сафеди LEDҳо дар расми иловагии S3 нишон дода шудааст.Як зарфи акрилиро (андозаашон 150 × 150 × 30 мм) бевосита дар назди массиви оинаи декамера, дар муқобили PSU ҷойгир кунед.Дуде, ки ҳангоми дар об ғарқ кардани яхи хушк ба вуҷуд омадааст, баъд ба зарфи акрилӣ рехта шуд, то ҷараёнҳои нӯҳ рангаи C1-C9-ро мушоҳида кунанд, ки аз массиви оинаҳои декахроматӣ мебароянд.
Интихобан, нури сафеди коллиматсияшуда (C0) пеш аз ворид шудан ба DP аз филтр мегузарад.Филтрҳо дар аввал филтрҳои зичии бетараф бо зичии оптикии 0,6 буданд.Сипас филтри мотордорро истифода баред (FW212C, FW212C, Thorlabs).Дар ниҳоят, филтри ND-ро дубора фаъол кунед.Маҷрои нӯҳ филтрҳои гузариш мутаносибан ба C9, C8, C7, C6, C5, C4, C3, C2 ва C1 мувофиқат мекунанд.Як ҳуҷайраи кварц бо андозаҳои дохилии 40 (дарозии оптикӣ) x 42,5 (баландӣ) x 10 мм (паҳно) дар назди як қатор оинаҳои декохроматӣ, дар муқобили BP ҷойгир карда шуд.Пас аз он дуд тавассути қубур ба ҳуҷайраи кварц ворид карда мешавад, то консентратсияи дудро дар ҳуҷайраи кварц нигоҳ дорад, то ҷараёнҳои нӯҳ ранги C1-C9-ро, ки аз массиви оинаи декахроматӣ мебароянд, тасаввур кунад.
Видеои ҷараёни нури тақсимшудаи нӯҳ ранг, ки аз як қатор оинаҳои деканикӣ мебарояд, дар режими вақтгузаронӣ дар iPhone XS сабт шудааст.Тасвирҳои саҳнаро дар 1 кадр / сония сабт кунед ва тасвирҳоро барои эҷод кардани видео дар 30 кадр / сония (барои видеои ихтиёрии 1) ё 24 кадр / сония (барои видеоҳои ихтиёрии 2 ва 3) ҷамъ кунед.
Дар лавҳаи диффузия як табақи аз пӯлоди зангногир 50 мкм ғафсӣ (бо чор сӯрохиҳои диаметри 50 мкм дар фосилаи 1 мм) ҷойгир кунед.Нури дарозии мавҷаш 400-750 нм ба пластинкаи диффузор шуоъ карда мешавад, ки бо роҳи гузаронидани нури лампаи галогенӣ аз филтри кӯтоҳи интиқоли дарозии мавҷи буридааш 700 нм ба даст меояд.Спектри нур дар расми иловагии S4 нишон дода шудааст.Интихобан, нур инчунин аз яке аз филтрҳои гузариши 10 нм, ки дар марказашон 530, 550, 570, 590, 610, 630, 650, 670 ва 690 нм ҷойгиранд, мегузарад ва ба плитаи диффузор мезанад.Дар натича дар пластинкаи аз пӯлоди зангногир дар муқобили плитаи диффузор чаҳор нуқтаи радиатсионӣ ба вуҷуд омад, ки диаметри φ50 мкм ва дарозии мавҷҳои гуногун доранд.
Массиви чоркапиллярӣ бо чор линза дар спектрометри нӯҳ ранга васл карда шудааст, ки дар расмҳои 1 ва 2 нишон дода шудааст. C1 ва C2.Чаҳор капилляр ва чаҳор линза ҳамон тавре ки дар таҳқиқоти қаблӣ буданд31,34.Шуои лазерии дарозии мавчаш 505 нм ва иктидори 15 мВт аз пахлу ба нуктахои партови чор капилляр дар як вакт ва баробар шуоъ карда мешавад.Флуорессенсияе, ки аз ҳар як нуқтаи эмиссия мебарояд, бо линзаи мувофиқ ҷамъ карда мешавад ва бо як қатор оинаҳои декахроматӣ ба нӯҳ ҷараёнҳои рангӣ ҷудо карда мешавад.Пас аз он 36 ҷараёнҳои ҳосилшуда мустақиман ба сенсори тасвири CMOS ворид карда шуданд (C11440–52U, Hamamatsu Photonics K·K.) ва тасвирҳои онҳо ҳамзамон сабт карда шуданд.
ABI PRISM® BigDye® Primer Cycle Sequencing Kit Reaction Ready (Applied Biosystems), 4 мкл ранг GeneScan™ 600 LIZ™ барои ҳар як капилляр бо омехта кардани 1 мкл PowerPlex® 6C Matrix Standard (Promega Corporation), стандарти андозаи 1 мкл омехта карда шуд.v2.0 (Thermo Fisher Scientific) ва 14 мкл об.PowerPlex® 6C Matrix Standard аз шаш порчаи ДНК иборат аст, ки бо шаш ранг нишон дода шудаанд: FL-6C, JOE-6C, TMR-6C, CXR-6C, TOM-6C ва WEN, бо тартиби дарозии ҳадди аксар.Дарозии асосии ин порчаҳои ДНК ифшо нашудааст, аммо пайдарпаии дарозии асосии порчаҳои ДНК бо нишони WEN, CXR-6C, TMR-6C, JOE-6C, FL-6C ва TOM-6C маълум аст.Омехта дар маҷмӯаи реаксияи омодагии ABI PRISM® BigDye® Primer Cycle Sequencing Reaction Ready дорои порчаи ДНК мебошад, ки бо ранги dR6G нишон дода шудааст.Дарозии пояҳои пораҳои ДНК низ ошкор нашудааст.GeneScan™ 600 LIZ™ Dye Size Standard v2.0 дорои 36 порчаҳои ДНК-и бо LIZ тамғагузоришуда мебошад.Дарозии асосии ин порчаҳои ДНК 20, 40, 60, 80, 100, 114, 120, 140, 160, 180, 200, 214, 220, 240, 250, 260, 280, 340, 30, 30 360, 380, 400, 414, 420, 440, 460, 480, 500, 514, 520, 540, 560, 580 ва 600 асос.Намунаҳо дар 94°С дар давоми 3 дақиқа денатурат карда шуда, сипас дар яхдон 5 дақиқа хунук карда шуданд.Намунаҳо ба ҳар капилляр бо шиддати 26 В/см барои 9 сония ворид карда шуданд ва дар ҳар як капилляр бо маҳлули полимерии POP-7™ (Thermo Fisher Scientific) бо дарозии самараноки 36 см ва шиддати 181 В/см пур карда шуданд. кунҷи 60 °.АЗ.
Ҳама маълумоте, ки дар ҷараёни ин таҳқиқот гирифта ё таҳлил карда шудаанд, ба ин мақолаи нашршуда ва маълумоти иловагии он дохил карда шудаанд.Дигар маълумоти марбут ба ин таҳқиқот аз муаллифони мувофиқ бо дархости асоснок дастрасанд.
Khan, MJ, Khan, HS, Yousaf, A., Khurshid, K., and Abbas, A. Тамоюлҳои ҷорӣ дар таҳлили тасвири гиперспекталӣ: барраси.Дастрасӣ ба IEEE 6, 14118–14129.https://doi.org/10.1109/ACCESS.2018.2812999 (2018).
Воган, AH Астрономии интерферометрии Фабри-Перот Спектроскопия.насб кунед.Муҳтарам Астрон.астрофизика.5, 139-167.https://doi.org/10.1146/annurev.aa.05.090167.001035 (1967).
Goetz, AFH, Wein, G., Solomon, JE ва Рок, BN Spectroscopy аз тасвирҳои дурдасти Замин.Илм 228, 1147–1153.https://doi.org/10.1126/science.228.4704.1147 (1985).
Yokoya, N., Grohnfeldt, C., and Chanussot, J. Fusion маълумоти hyperspectral ва multispectral: баррасии муқоисавии нашрияҳои охирин.Илмҳои Замин IEEE.Маҷаллаи ташхиси фосилавӣ.5:29–56.https://doi.org/10.1109/MGRS.2016.2637824 (2017).
Gowen, AA, O'Donnell, SP, Cullen, PJ, Downey, G. and Frias, JM Hyperspectral Imaging як воситаи нави таҳлилӣ барои назорати сифат ва бехатарии ғизо мебошад.Тамоюлҳо дар илми ғизо.технология.18, 590-598.https://doi.org/10.1016/j.tifs.2007.06.001 (2007).
ElMasri, G., Mandour, N., Al-Rejaye, S., Belin, E. and Rousseau, D. Барномаҳои охирини Imaging multispectral барои мониторинги фенотип ва сифати тухмӣ - баррасии.Сенсорҳо 19, 1090 (2019).
Liang, H. Пешрафтҳо дар Imaging Multispectral ва Hyperspectral барои археология ва ҳифзи санъат.Барои рақамҳои ҷисмонӣ 106, 309–323 муроҷиат кунед.https://doi.org/10.1007/s00339-011-6689-1 (2012).
Edelman GJ, Gaston E., van Leeuwen TG, Cullen PJ ва Alders MKG Imaging Hyperspectral барои таҳлили бидуни тамоси нишонаҳои криминалистӣ.Криминалистика.дохилй 223, 28-39.https://doi.org/10.1016/j.forsciint.2012.09.012 (2012).
Вақти фиристодан: январ-10-2023